李玉洁 , 赵成日^*

延边大学农学院, 延吉, 133002
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2018年05月29日    接受日期: 2018年06月19日    发表日期: 2019年01月16日

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本研究以中国古老月季新鲜幼叶为试材，进行 RAPD 分子标记反应扩增体系的优化。对RAPD-PCR反应结果影响较大的五个因素(模板 DNA 的浓度, 引物的浓度, MgCl2 的浓度, dNTP 的浓度, Taq DNA 聚合酶的浓度) 进行了单因素多水平设计。结果表明：20 滋L 总反应体积中含模板 DNA (10 ng/滋L) 1.0 滋L、dNTP (2.5 mmol/L) 1.6 滋L、引物 (2.0 滋mol/L) 1.5 滋L、MgCl2 (25 mmol/L) 1.6 滋L、Taq DNA 聚合酶 (5 U/滋L) 0.3 滋L、10伊Buffer 用量 2.0 滋L，其余用去离子水补充。通过优化后的 RAPD-PCR 反应体系可获得清晰、稳定、条带多的电泳图，表明以上反应条件适合中国古老月季 RAPD 分子标记反应的体系。该体系的建立有利于中国古老月季的亲缘关系和遗传多样性分析。

中国古老月季；反应体系；RAPD；优化